Постійна МСАО индуцировали виконує краніотомія наступним коагуляції і руйнування середньої мозкової артерії діатермією поєднанні з постійною оклюзії ipsilesional загальної сонної артерії і 60 хв оклюзії contralesional загальної сонної артерії. Схема установки обладнання і оклюзії MCA показано на малюнку 1, і сонних артерій на малюнку 2 (вище).

Результат Інсульт оцінювали через 24 год і через 8 тижнів після інсульту шляхом вимірювання об'єму інфаркту на 40 х 0,5 мм зрізів (від ростральної кінці нюхової цибулини до ростральної кінці спинного мозку) за допомогою області інтересу інструментарію в пакеті дисплея медичних зображень. Представник Т2 зважених структурний МРТ показано на тому самому тварину в 24 ч і 8 тижнів (Фіг.3). Обсяг інфаркту був пізнаний областях мозку щура показує сигнал гіперінтенсивного; як вага T2ред зображення показують воду або плазму як яскравий білий області. Відомо, що є збільшення в набряк і набухання головного мозку після інсульту, і це може бути виміряна з T2-зважених сканування, яка була корелює з гістологічними вимірами обсягу 18 інфаркту. Проте, набряк присутній в ранні терміни після інсульту (наприклад, через 24 години) може привести до завищення обсягу остаточною поразкою (наприклад, через 8 тижнів), і тому ми також представляємо середні інфаркту обсяги скориговані з використанням формул Gerriet в. 3В показує середні дані, отримані сирої (без коригувань) обсяг поразки через 24 години, як 62,8 мм 3 (± 25,4 мм 3 SD, верхній графік); це займає 9,8% ураженої півкулі (± 4,2% SD, середній графік). Коли роблять поправку на набухання мозку з використанням формул Gerriets "це значення знижується до 4,5% (± 2,0% SD, нижній графік).

Тяжкість інсульту також вимірювали за допомогою тесту 15 сходи Монтойя. Коротше кажучи, аnimals були попередньо навчені для вилучення цукру гранули протягом 4 тижнів до MCAO інсульту хірургії, і проходять протягом 8 тижнів після інсульту (малюнок 4), щоб підтвердити стійкий дефіцит. Щурів поміщали в сходовій апарату протягом 10 хв, а кількість гранул витягується був записаний (з 21 гранул) і відображається у відсотках (група означає ± стандартні помилки). Регресійний аналіз був проведений, щоб відповідати рядок даних.

На малюнку 5 показана Розрахунок розміру вибірки з використанням даних обсягу інфаркту (для потенційних наслідків кандидатів терапії), аналізували з використанням алгоритму в програмному забезпеченні аналізу потужності для Т-тест з використанням "Різниця між двома незалежними засобами (дві групи)" і за допомогою кнопок (без поправки) і стандартні відхилення від 3В. Інформація, що міститься в малюнку 5 і в таблиці 1, показують, що 12 щурів потрібно на групу виявити терапію, яка скоротила інфОб'ем ARCT на 50% через 24 години, в той час як на фіг.6 показаний "XY ділянку" влади досягнута при використанні різної кількості тварин. У таблиці 1 наведені розрахунки розмір вибірки для всіх тимчасових точках.

Малюнок 3. Т2-зважених структурний МРТ використовується для визначення розміру інфаркту і набряку мозку після інсульту. (A) Т2-зважених магнітного резонансу зображення того ж мозку щура 24 год і 8 тижнів після індукції інсульту. Біла область являє собою поразку, але також містить деяку вазогенний набряк, який дозволяє на 8 тижнів. Обсяги (Б) інфаркту вимірювали за допомогою медичного зображення дисплея пакетів цікавить області Toolkit, і наносять на графік, який представляє собою середнє ± SD для 3 тимчасових точок, які використовуються (N = 6). Сировина обсяг ураження (без поправки на мозку пухлина через редEMA), відсоток ураження постраждалих півкулі (без поправки для набухання), і відсоток поразки півкулі з поправкою на набухання мозку з використанням формул Gerriets, розкриваються тут. SD був використаний замість SEM для виконання розрахунків розміру вибірки (малюнок 5). Будь ласка, натисніть тут, щоб подивитися велику версію цієї постаті.

Малюнок 4. Тест під'їзд показує порушення в розумінні і вилучення гранул. У цій моделі інсульту було дуже мало спонтанне одужання. Інсульт у літніх щурів наполегливо погіршує спритність, показаний щотижневої тестування з використанням "тест сходи" пеллет йдуть. Врізка: Зображення щура проводить випробування в поведінці. Графік показує середнє (± Стендаль р д помилка) кількість гранул, одержуваних (з 21, виражене у відсотках) в тиждень постраждалої лапи. п = 5. Будь ласка, натисніть тут, щоб подивитися велику версію цієї постаті.

Малюнок 5. Розрахунок розміру вибірки для визначення номера групи щурів, необхідних для виявлення бажаного терапевтичного ефекту. Це знімок екрана, взяті з програмного забезпечення для аналізу потужності, показує, що 12 щурів в групі необхідно буде виявити терапію, яка скоротила обсяг інфаркту на 50% Через 24 години. Будь ласка, натисніть тут, щоб подивитися велику версію цієї постаті.

Малюнок 6. Потужність досягається використанням різних загального числа тварин. А.Н. "XY графік для діапазону значень" з програмного забезпечення для аналізу потужності показує силу яка буде отримана в експериментах з використанням різних (загальна) число літніх щурів, враховуючи параметри показано на малюнку 5. в таблиці 1 приведені всі наші результати. Будь ласка, натисніть тут, щоб подивитися велику версію цієї постаті.

Час після інсульту:Кількість щурів на групу, необхідного для виявлення зниження обсягу пошкодження від:

75% 50% 25% 24 ч 6 12 42 8 тижнів 4 5 17

Таблиця 1. Розрахунки розмірів вибірки в кожній групі для гіпотетичних майбутніх експериментів. Розрахункова з використанням програмного забезпечення для аналізу потужності (малюнки 5 і 6). Таблиця показує кількість щурів в групі, необхідного для двухгрупповой експерименту в виявляти 25%, 50% і 75% зменшення обсягу ураження в на кожному з часових точках в цьому дослідженні.